較常用的分離方法有：\x0d（一）柱層析法\x0d分離黃酮類化合物常用的吸附劑或載體有硅膠、聚酰胺及纖維素粉等.此外,也有用氧化鋁、氧化鎂及硅藻土等.\x0d1.硅膠柱層析：\x0d此法應(yīng)用范圍最廣,主要適于分離異黃酮、二氫黃酮、二氫黃酮醇及高度甲基化（或乙酰化）的黃酮及黃酮醇類.少數(shù)情況下,在加水去活化后也可用于分離極性較大的化合物,如多羥基黃酮醇及其苷類等.\x0d2. 聚酰胺柱層析：\x0d對分離黃酮類化合物來說,聚酰胺是較為理想的吸附劑.其吸附強(qiáng)度主要取決于黃酮類化合物分子中羥基的數(shù)目與位置及溶劑與黃酮類化合物或與聚酰胺之間形成氫鍵締合能力的大小.\x0d聚酰胺柱層析可用于分離各種類型的黃酮類化合物,包括苷及苷元、查耳酮與二氫黃酮等\x0d3.葡聚糖凝膠(Sephadex gel)柱層析：\x0d對于,主要用兩種型號的凝膠：Sephadex-G型及Sephadex-LH-20型.\x0d葡聚糖凝膠分離黃酮類化合物的機(jī)理是：\x0d分離游離黃酮時,主要靠吸附作用.凝膠對黃酮類化合物的吸附程度取決于游離酚羥基的數(shù)目.但分離黃酮苷時,則分子篩的屬性起主導(dǎo)作用.在洗脫時,黃酮苷類大體上是按分子量由大到小的順序流出柱體.\x0d分離游離黃酮主要是吸附作用,極性小到大順序洗脫.\x0d分離黃酮苷類,主要是分子篩作用,分子大到小順序洗脫.\x0d總的洗脫順序：糖多的苷到糖少的苷到游離苷元（極性小到大）\x0d葡聚糖凝膠柱層析中常用的洗脫劑有：\x0d堿性水溶液（如0.1mol/L NH4OH）,含鹽水溶液(0.5mol/L NaCl等).\x0d醇及含水醇,如甲醇,甲醇-水（不同比例）、t-丁醇-甲醇(3:1)、乙醇等.\x0d其它溶劑：如含水丙酮、甲醇-氯仿等.\x0d二）梯度pH萃取法\x0d梯度pH萃取法適合于酸性強(qiáng)弱不同的黃酮苷元的分離.根據(jù)黃酮類苷元酚羥基數(shù)目及位置不同其酸性強(qiáng)弱也不同的性質(zhì),可以將混合物溶于有機(jī)溶劑（如乙醚）后,依次用5%NaHCO3、5%Na2CO3、0.2% NaOH及4%NaOH水溶液萃取,來達(dá)到分離的目的.\x0d酸性:7,4-二OH溶于5%NaHCO3液 ) 7-或4-OH （5%Na2CO3液） 一般OH（0.2%NaOH） 5-OH （4% NaOH液）\x0d具黃酮類化合物與鉛鹽生成的沉淀,濾集后按常法懸浮在乙醇中,通入H2S進(jìn)行復(fù)分解,濾除硫化鉛沉淀,濾液中可得到黃酮類化合物.但初生態(tài)的PbS沉淀具有較高的吸附性,因此現(xiàn)多不主張用H2S脫鉛,而用硫酸鹽或磷酸鹽,或用陽離子交換樹脂脫鉛.\x0d有鄰二酚羥基的黃酮可與硼酸絡(luò)合,生成物易溶于水,可與不具上述結(jié)構(gòu)的黃酮類化合物相互分離.