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  • 電泳液中加入SDS的作用是什么?

    電泳液中加入SDS的作用是什么?
    生物人氣:859 ℃時間:2020-06-16 20:41:55
    優(yōu)質(zhì)解答
    如果你是做測量蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量大小的話:
    聚丙烯酰胺凝膠電泳具有較高分辨率,用它分離、檢測蛋白質(zhì)混合樣品,主要是根據(jù)各蛋白質(zhì)組分電泳遷移率的不同.這種差異就蛋白質(zhì)分子本身而言,主要與其所帶電荷的差異以及分子大小不同有關(guān).如果將電荷差異這一因素去除或減小到可以忽略不計的程度,分子在凝膠上遷移率的大小則完全取決于相對分子質(zhì)量的大小.
    十二烷基硫酸鈉(SDS)是一種陰離子表面活性劑,當其與蛋白質(zhì)混合,質(zhì)量比達到1.4:1時,SDS能破壞蛋白質(zhì)分子間以及其他物質(zhì)分子間的非共價鍵使蛋白質(zhì)的構(gòu)象發(fā)生變化繼而使蛋白質(zhì)變性解離成單一亞基,從而降低或消除了各種蛋白質(zhì)分子間的天然電荷差異,形成SDS-蛋白質(zhì)負離子,這樣就使電泳遷移率只取決于分子大小這一因素.據(jù)經(jīng)驗得知,當?shù)鞍踪|(zhì)的相對分子質(zhì)量在17000-165000之間時,蛋白質(zhì)-SDS復合物的電泳遷移率與蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量的對數(shù)呈線性關(guān)系,于是根據(jù)標準蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量的對數(shù)和遷移率所作的標準曲線,可求得未知蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量.
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