實時熒光定量PCR的一點問題
實時熒光定量PCR的一點問題
定量PCR實驗步驟（以mRNA為例）：
1.設(shè)計實驗方案：例如對樣品、實驗組和對照組的一個實驗流程設(shè)計
2.引物和探針的設(shè)計和合成
3.抽提RNA,測定提取的RNA的濃度
4.反轉(zhuǎn)錄PCR
5.定量PCR
6.數(shù)據(jù)分析
為什么在步驟中要抽提RNA,并要反轉(zhuǎn)錄PCR
為什么不能直接擴(kuò)增 mRNA 而要反轉(zhuǎn)錄之后擴(kuò)增cDNA?
定量PCR實驗步驟（以mRNA為例）：
1.設(shè)計實驗方案：例如對樣品、實驗組和對照組的一個實驗流程設(shè)計
2.引物和探針的設(shè)計和合成
3.抽提RNA,測定提取的RNA的濃度
4.反轉(zhuǎn)錄PCR
5.定量PCR
6.數(shù)據(jù)分析
為什么在步驟中要抽提RNA,并要反轉(zhuǎn)錄PCR
為什么不能直接擴(kuò)增 mRNA 而要反轉(zhuǎn)錄之后擴(kuò)增cDNA?
生物人氣：860 ℃時間：2020-05-08 21:16:40
優(yōu)質(zhì)解答
實時定量目的就在于測定樣品mRNA水平的含量啊!要獲取擴(kuò)增反應(yīng)之初的模板量,必然要先提取總RNA,用多聚T引物將全部的mRNA反轉(zhuǎn)錄得到cDNA作為模板,再通過后續(xù)檢測得出結(jié)果.
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