Ⅰ、斐林試劑 (檢驗還原糖)
①配制方法:
步驟:1、將36.4g CuSO4.5H2O溶于200mL水中;
2、用0.5mL濃硫酸酸化,再用水稀釋到500mL待用;
3、取173g酒石酸鉀鈉KNaC4H4O6.4H2O,71g NaOH固體溶于400mL水中;
4、再稀釋到500mL,使用時取等體積兩溶液混合.
②試劑應(yīng)用:
檢驗還原糖
步驟:1、向試管內(nèi)注入2mL待測組織樣液.
2、向試管內(nèi)注入1mL斐林試劑(甲乙液混合均勻后再注入).
3、將試管放入盛有50~60℃溫水的大燒杯中加熱約2min.
4、觀察試管中出現(xiàn)的顏色變化.(若能夠生成磚紅色的沉淀,便可以判
斷還原糖的存在,溶液的顏色變化過程為:淺藍色→棕色→磚紅色沉淀)
Ⅱ、班氏試劑 (檢驗還原糖)
①配制方法:
步驟:1、400mL水中加85g檸檬酸鈉和50g無水碳酸鈉;
2、50mL加熱的水中加入8.5g無水硫酸銅制成CuSO4溶液;
3、把CuSO4溶液倒入檸檬酸鈉溶液-Na2CO3中,邊加邊攪,如產(chǎn)生沉淀可濾去.
②試劑應(yīng)用:
檢驗還原糖
原理:檸檬酸鈉和碳酸鈉均為強堿弱酸鹽,在水中它們均可水解產(chǎn)生OH-,與檸檬酸鈉-Na2CO3溶液和CuSO4溶液混合時,Cu2+和OH-結(jié)合,生成Cu(OH)2與葡萄糖中的醛基反應(yīng)生成磚紅色沉淀.
Ⅲ、雙縮脲試劑 (檢驗蛋白質(zhì))
①配制方法:雙縮脲試劑A的成分是氫氧化鈉的質(zhì)量分數(shù)為0.1 g/mL的水溶液;雙縮脲試劑B的成分是硫酸銅的質(zhì)量分數(shù)為0.01 g/mL的水溶液組合而成.
②試劑應(yīng)用:
檢驗蛋白質(zhì)
步驟:1、將雙縮脲試劑A加入組織樣液,振蕩均勻(必須營造堿性環(huán)境).
2、加入雙縮脲試劑B,搖蕩均勻.如果組織里含有蛋白質(zhì),那么會看到溶液變成紫色.
原理:具有兩個或兩個以上肽鍵的化合物皆可與雙縮脲試劑產(chǎn)生紫色反應(yīng).蛋白質(zhì)的肽鍵在堿性溶液中能與Cu2+絡(luò)合成紫紅色的化合物.顏色深淺與蛋白質(zhì)濃度成正比.
Ⅳ、蘇丹溶液 (檢驗脂肪)
①配制方法:
步驟:1、蘇丹III或蘇丹IV粉0.1g;
2、取95%酒精10ml;
3、過濾后再加入10ml甘油
②試劑應(yīng)用:
檢測脂肪
原理:蘇丹Ⅲ可將脂肪染成橘黃色,蘇丹Ⅳ將脂肪染成紅色.
這是我畢業(yè)之前有收藏的DOC文檔.要的話提供郵箱我發(fā)過去給你,圖文并茂.