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  • iptg誘導(dǎo)前后在SDS電泳結(jié)果中怎么看

    iptg誘導(dǎo)前后在SDS電泳結(jié)果中怎么看
    其他人氣:863 ℃時間:2020-06-25 10:26:35
    優(yōu)質(zhì)解答
    加入IPTG后有目標(biāo)蛋白表達(dá),正常情況下,兩個泳道相比,應(yīng)該能在誘導(dǎo)后的泳道看到有某一個比較明顯的蛋白條帶的增粗.這個條帶的位置可以根據(jù)目標(biāo)蛋白的預(yù)計分子量大小來找,當(dāng)然有時候不是嚴(yán)格與預(yù)測分子量一致,會多少有點出入,但是表達(dá)成功的話,會有明顯不一樣的條帶的.
    如果表達(dá)量不大,就需要稍微仔細(xì)一點,條帶增粗可能不是很明顯,但是還是可見的.
    如果兩個泳道從上到下比較后發(fā)現(xiàn),條帶完全一致,在誘導(dǎo)后沒有出現(xiàn)明顯增粗的條帶,則說明表達(dá)不成功.需要再回過頭來檢查是載體構(gòu)建有問題,還是IPTG加入時間,濃度,誘導(dǎo)時間有問題.
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