從標(biāo)簽之前的啟動(dòng)子算起,直接算到pet⑵8a上的終止子為止.計(jì)算份子量的方法：3個(gè)堿基對(duì)應(yīng)1個(gè)蛋白質(zhì),每一個(gè)蛋白質(zhì)的份子量平均為110Da.我認(rèn)為你的目的蛋白的份子量極可能是380/3*011+3=17kD左右.式子中的3kD是pet28a載體上的MCS的大小,如果你自己沒(méi)有加啟動(dòng)子和終止碼,那末MCS就默許為是全部表達(dá).另外一個(gè)問(wèn)題是,pet⑵8a上有兩個(gè)6*His tag,它們的帶電性嚴(yán)重影響了蛋白質(zhì)在SDS-PAGE上的表觀(guān)份子量.所以你跑膠的時(shí)候可能看到的不是17kd左右,極可能比它大1點(diǎn).查看原帖>>