誤差造成的原因太多了,這種情況最需避免的就是加樣的時候造成了加樣量之間的誤差,建議多做幾個重復(fù),將重復(fù)中數(shù)據(jù)明顯差距幾個以上的循環(huán)的數(shù)據(jù)剔除.加樣的時候樣品混合好再分裝.我做了三個復(fù)孔，每個復(fù)孔之間Ct值差距不超過0.5。單次的目的基因表達量與看家基因相比之后，對同一批次逆轉(zhuǎn)錄的cDNA再次進行realtime PCR,常常發(fā)現(xiàn)兩次的相對表達量差異很大。比如A次的表達是5倍，B次的表達式0.5倍。為什么呢。謝謝看起來很正常嘛，沒有啥差異啊。你要看最后的柱狀圖是差距很大嘛？我沒有看出由上調(diào)變下調(diào)的情況啊。