可能是cDNA降解,也有可能你檢測的片段表達量低,也有可能pcr mix有問題
建議多做幾個復孔,選取其中的數據,或者重新設計引物
做Realtime PCR時同樣的復孔溶解曲線有的單峰特異,有的多峰
做Realtime PCR時同樣的復孔溶解曲線有的單峰特異,有的多峰
Realtime PCR第一次做溶解曲線都是好的,后來同樣的引物同樣的條件和cDNA結果出來的溶解曲線卻是多峰的,而且4個復孔中經常只有1、2個孔曲線特異,其他的有多峰.這是為什么,是條件不合適,還是操作有問題或者cDNA模板有問題,這跟模板濃度有關嗎?
Realtime PCR第一次做溶解曲線都是好的,后來同樣的引物同樣的條件和cDNA結果出來的溶解曲線卻是多峰的,而且4個復孔中經常只有1、2個孔曲線特異,其他的有多峰.這是為什么,是條件不合適,還是操作有問題或者cDNA模板有問題,這跟模板濃度有關嗎?
其他人氣：470 ℃時間：2020-04-09 05:09:33
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