我把我本科 的實(shí)驗(yàn)體系給你,你參考下.
（1） 最佳DNA模板量
在PCR擴(kuò)增系統(tǒng)中DNA模板的純度和數(shù)量都會(huì)對(duì)結(jié)果產(chǎn)生影響.模板DNA抽提純化不徹底殘留苯酚,乙醇等物質(zhì)將無(wú)法準(zhǔn)確的擴(kuò)增出預(yù)期結(jié)果；模板DNA用量過(guò)低會(huì)使擴(kuò)增過(guò)程不完整,出現(xiàn)產(chǎn)物少,條帶弱的結(jié)果；模板DNA用量過(guò)高又會(huì)出現(xiàn)非特異條帶增多,背景彌散狀[106].本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明模板量在20ng-100ng間條帶都比較清晰,差異不大.從節(jié)約最優(yōu)原則考慮選擇20ng模板量（圖3-9-a）.
（2）最佳Mg2+濃度
Mg2+濃度為2.0mmol/L時(shí),所擴(kuò)增的條帶數(shù)最多,而且比較清晰,綜合考慮本實(shí)驗(yàn)最佳Mg2+濃度定位2.0mmol/L.
（3） 最佳Taq酶濃度
在25µl的反應(yīng)體系中2UTaq酶用量最優(yōu).條帶清晰,且數(shù)目較多.
（4） 最佳dNTP濃度
本實(shí)驗(yàn)設(shè)定的5個(gè)dNTP梯度擴(kuò)增結(jié)果看200μmol/L時(shí)條帶最清晰選為最佳濃度（圖3-9-d）.
（5） 最佳引物濃度
本實(shí)驗(yàn)引物濃度選取0.2μmol/L（圖3-9-e）.
（6） 最佳退火溫度
本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)反應(yīng)體系退火溫度為52℃時(shí),