葉綠體色素的提取和分離（紙層析法）
原理
葉綠體色素是植物吸收太陽光能進(jìn)行光合作用的重要物質(zhì),主要由葉綠素a、葉綠素b、胡蘿卜素和葉黃素組成.從植物葉片中提取和分離色素是對(duì)其認(rèn)識(shí)和了解的前提.利用葉綠體色素能溶于有機(jī)溶劑的特性,可用丙酮提取.
分離色素的方法有多種,紙層析是其中最簡便的一種.當(dāng)溶劑不斷地從層析濾紙上流過時(shí),由于混合物中各成分在兩相（即流動(dòng)相和固定相）間具有不同的分配系數(shù),它們的移動(dòng)速度不同,使樣品中的混合物得到分離.
儀器藥品
大試管 臺(tái)天平
研缽 量筒
燒杯 漏斗
軟木塞 新華濾紙
丙酮 四氯化碳
無水硫酸鈉 碳酸鈣
石英砂
操作步驟
1．稱取新鮮葉子2g,放入研缽中加丙酮5ml,少許碳酸鈣和石英砂,研磨成勻漿,再加丙酮5ml,然后以漏斗過濾之,即為色素提取液.
2．取準(zhǔn)備好的濾紙條（2×20cm）,將其一端剪去兩側(cè),中間留一長約1.5cm,寬約0.5cm的窄條,如圖7.
3．用毛細(xì)管取葉綠素溶液點(diǎn)于窄條的上方,注意一次所點(diǎn)溶液不可過多,如色素過淡,用電吹風(fēng)吹干后再點(diǎn)1梍2次.
4．在大試管中加入四氯化碳3梍5ml及少許無水硫酸鈉.然后將濾紙條固定于軟木塞上,插入試管內(nèi),使窄端浸入溶劑中（色素點(diǎn)要略高于液面,濾紙條邊緣不可碰到試管壁）,蓋緊軟木塞,直立于陰暗處進(jìn)行層析.
經(jīng)過0.5—1小時(shí)后,觀察分離后色素帶的分布.最上端橙黃色為胡蘿卜素,其次黃色為葉黃素,再下面藍(lán)綠色為葉綠素a,最后的黃綠色為葉綠素b.