電泳出現(xiàn)拖尾現(xiàn)象,英文成為smear,就是彌散.其原因,主要從以下兩個方面考慮：
1、PCR產(chǎn)物自身原因：
往往由于酶量過多或酶的質(zhì)量差,dNTP濃度過高,Mg2+濃度過高,退火溫度過低,循環(huán)次數(shù)過多,而造成PCR的非特異性產(chǎn)物 過多.
對策：①減少Taq酶的量,或調(diào)換另一來源的酶.②減少dNTP的濃度.③適當(dāng)降低Mg2+濃度.④增加模板量,減少引物的用量 ,減少循環(huán)次數(shù),提高退火溫度.
2、電泳體系的問題：
（1）電泳緩沖液TAE或者TBE的污染,建議更換緩沖液.（2）上樣時樣品漂了,建議增加上樣緩沖液的用量,以及小心加樣.（3）電壓太高.（4）適當(dāng)把你的膠的濃度加大.（根據(jù)你的片斷大小而定）（5）觀察你的marker是否也存在拖尾現(xiàn)象,作為對照.
以前有挺多人問過這個問題了 借用下以往問題的最佳答案