PCR需要注意以下事項：
1.模板
盡量避免含有酶抑制劑!
2.引物
保存時間不易過長,要符合引物涉及的原則,在用軟件設計結(jié)束后要進行適當?shù)娜斯ぬ幚?引物濃度要合適,太高容易引起錯配及非特異性產(chǎn)物的形成.
3.循環(huán)參數(shù)
一般退火溫度應低于Tm值5℃.先循環(huán)數(shù)次,然后延伸幾分鐘,再進行循環(huán),有時候可以加大產(chǎn)物的量
4.酶濃度
過高容易導致非特異性產(chǎn)物的形成
5.離子濃度
過高容易導致非特異性產(chǎn)物的增加
6.dNTP
濃度過高會抑制酶的活性,引起錯配