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  • 如何將分子量相同的單鏈DNA與單鏈RNA分開

    如何將分子量相同的單鏈DNA與單鏈RNA分開
    其中有一個答案是加堿來區(qū)分.DNA可以被分離出來,為什么?
    生物人氣:319 ℃時間:2020-02-06 08:58:52
    優(yōu)質(zhì)解答
    用化學(xué)方法水解核酸能夠得到什么產(chǎn)物取決于核酸分子中磷酸二酯鍵和N-糖苷鍵對酸、堿的相對穩(wěn)定性.
    RNA中,核糖與堿基之間的N-糖苷鍵對堿穩(wěn)定,RNA主鏈中的磷酸二酯鍵一般也對堿穩(wěn)定,因此RNA通常應(yīng)該不被水解.但是,RNA分子由于核糖上有2′-羥基,存在鄰接基團參與效應(yīng),在堿催化下,RNA分子中的磷?;l(fā)生轉(zhuǎn)移,生成2′,3′-環(huán)狀單核苷酸中間產(chǎn)物,環(huán)核苷酸再進一步水解成2′-核苷酸和3′-核苷酸.DNA則一般不被堿水解.
    堿水解RNA時,A、C、G、U、I、T的單核甘酸和幾種甲基化堿基是穩(wěn)定的,m1A轉(zhuǎn)變?yōu)閙6A,m3C轉(zhuǎn)變?yōu)閙3U,而m7G、m1I、tC6A、m6tC8A會被堿破壞.修飾組分2′-O-甲基核糖核苷酸由于不能形成2′,3′-環(huán)核苷酸,因此該處的磷酸二酸鍵不被堿水解,產(chǎn)物中出現(xiàn)NmNp和NmNmNp等寡核苷酸.大腸桿菌16S rRNA中的m62Am62Ap也有很強的抗堿性,用1mol∕L NaOH,37℃水解9小時后仍有38%殘存,而通常RNA用0.3mol∕L NaOH,37℃作用18小時即可完全水解.
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