1.DNA溶于苯酚而RNA不溶,故可用苯酚來沉淀
這是最簡單的方法.
2.利用吖啶橙的變色特性可鑒別DNA和RNA.吖啶橙作為一種熒光染料已被用于染色固定,非固定細(xì)胞核酸,或作溶酶體的一種標(biāo)記.觀察死亡細(xì)胞熒光變色性變化以及區(qū)別分裂細(xì)胞和靜止細(xì)胞群體.雖然測定DNA和RNA含量時較難獲得好的重復(fù)性結(jié)果,但該方法已被許多實(shí)驗(yàn)室廣泛采用.
下面是生物化學(xué)的總結(jié)知識
1.兩性解離:DNA無,只有酸解離(○P),堿基被屏蔽(在分子內(nèi)部形成了H鍵).
RNA有,有PI.
2.粘度大:DNA>RNA,粘度由分子長度/直徑?jīng)Q定,DNA為線狀分子,RNA為線團(tuán).
3.堿的作用:DNA耐堿
RNA易被堿水解.
4.顯色反應(yīng):鑒別DNA和RNA
濃HCl 濃HCl
RNA ------→ 綠色化合物 DNA ------→ 藍(lán)紫色化合物
苔黑酚 二苯胺
啡啶溴紅(熒光染料)和溴嘧啶都可對DNA染色,原理是卡在分子中,DNA的離心
和電泳顯色可用它們.
5.溶解性:都溶于水而不溶于乙醇,因此,常用乙醇來沉淀溶液中的DNA和RNA.DNA溶于苯酚而RNA不溶,故可用苯酚來沉淀RNA.
6.紫外吸收:核酸的λm=260nm,堿基展開程度越大,紫外吸收就越厲害.
當(dāng)A=1時,DNA:50ug/ml,RNA和單鏈DNA:40ug/ml,寡核苷酸:20ug/ml.
用A260/A280還可來表示核酸的純度:>1.8,DNA很純;>2RNA很純.
7.沉降速度:對于拓?fù)洚悩?gòu)體(核苷酸數(shù)目相同的核酸),其沉降速度為:
RNA > 超螺旋DNA > 解鏈環(huán)狀DNA > 松弛環(huán)狀DNA > 線形DNA
也就是在離心管中最上層是線形DNA,最下面是RNA.
8.電泳:核苷酸、核酸均可以進(jìn)行電泳,泳動速度主要由分子大小來決定,因此,電泳是測定核酸分子量的好方法.
9.DNA分子量測定最直接的方法:用適當(dāng)濃度的EB(溴嘧啶)染色DNA,可以將其他形式的DNA變成線形DNA,用電鏡測出其長度,按B-DNA模型算出bp數(shù),根據(jù)核苷酸的平均分子量就可計(jì)算出DNA的分子量
一個單鏈DNA和一個單鏈RNA分子量相同,可以用那幾種方法將他們分開
一個單鏈DNA和一個單鏈RNA分子量相同,可以用那幾種方法將他們分開
生物人氣:687 ℃時間:2020-02-06 08:41:11
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