pcr技術(shù)在DNA復(fù)制中起到什么作用?
pcr技術(shù)在DNA復(fù)制中起到什么作用?
生物人氣:301 ℃時間:2020-01-26 02:41:29
優(yōu)質(zhì)解答
放大作用DNA的半保留復(fù)制是生物進化和傳代的重要途徑.雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解旋成單鏈,在DNA聚合酶的參與下,根據(jù)堿基互補配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝.在實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當...減少DNA復(fù)制的成功率Khorana (1971)等最早提出核酸體外擴增的設(shè)想:“經(jīng)DNA變性,與合適的引物雜交,用DNA聚合酶延伸引物,并不斷重復(fù)該過程便可合成tRNA基因。”但由于當時基因序列分析方法尚未成熟,熱穩(wěn)定DNA聚合酶尚未報道以及引物合成的困難,這種想法似乎沒有實際意義。加上70年代初分子克隆技術(shù)的出現(xiàn)提供了一種克隆和擴增基因的途徑,所以,Khorana的設(shè)想被人們遺忘了。1985年,Kary Mullis在Cetus公司工作期間,發(fā)明了PCR。Mullis要合成DNA引物來進行測序工作,卻常為沒有足夠多的模板DNA而煩惱。1983年4月的一個星期五晚上,他開車去鄉(xiāng)下別墅的路上,猛然閃現(xiàn)出“多聚酶鏈式反應(yīng)”的想法。1983年12月,Mullis用同位素標記法看到了10個循環(huán)后的49 bp長度的第一個PCR片段;1985年10月25日申請了PCR的專利,1987年7月28日批準(專利號4,683,202 ),Mullis是第一發(fā)明人;1985年12月20日在Science雜志上發(fā)表了第一篇PCR的學(xué)術(shù)論文,Mullis是共同作者;1986年5月,Mullis在冷泉港實驗室做專題報告,全世界從此開始學(xué)習(xí)PCR的方法
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