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  • 凱氏定氮法測定時需要注意什么問題

    凱氏定氮法測定時需要注意什么問題
    化學(xué)人氣:198 ℃時間:2020-03-22 23:21:15
    優(yōu)質(zhì)解答
    (1) 樣品應(yīng)是均勻的.固體樣品應(yīng)預(yù)先研細(xì)混勻,液體樣品應(yīng)振搖或攪拌均勻.
    (2) 樣品放入定氮瓶內(nèi)時,不要沾附頸上.萬一沾附可用少量水沖下,以免被檢樣消化不完全,結(jié)果偏低.
    (3) 硝化時如不容易呈透明溶液,可將定氮瓶放冷后,慢慢加入30%過氧化氫(H2O2)2-3ml,促使氧化.
    (4) 在整個消化過程中,不要用強(qiáng)火.保持和緩的沸騰,使火力集中在凱氏瓶底部,以免附在壁上的蛋白質(zhì)在無硫酸存在的情況下,使氮有損失.
    (5) 如硫酸缺少,過多的硫酸鉀會引起氨的損失,這樣會形成硫酸氫鉀,而不與氨作用.因此,當(dāng)硫酸過多的被消耗或樣品中脂肪含量過高時,要增加硫酸的量.
    (6) 加入硫酸鉀的作用為增加溶液的沸點,硫酸銅為催化劑,硫酸銅在蒸餾時作堿性反應(yīng)的指示劑.
    (7) 混合指示劑在堿性溶液中呈綠色,在中性溶液中呈灰色,在酸性溶液中呈紅色.如果沒有溴甲酚綠,可單獨使用0.1%甲基紅乙醇溶液.
    (8) 氨是否完全蒸餾出來,可用PH試紙試餾出液是否為堿性.
    (9) 吸收液也可以用0.01當(dāng)量的酸代表硼酸,過剩的酸液用0.01N堿液滴定,計算時,A為試劑空白消耗堿液數(shù),B為樣品消耗堿液數(shù),N為堿液濃度,其余均相同.
    (10) 以硼酸為氨的吸收液,可省去標(biāo)定堿液的操作,且硼酸的體積要求并不嚴(yán)格,亦可免去用移液管,操作比較簡便.
    (11) 向蒸餾瓶中加入濃堿時,往往出現(xiàn)褐色沉淀物,這是由于分解促進(jìn)堿與加入的硫酸銅反應(yīng),生成氫氧化銅,經(jīng)加熱后又分解生成氧化銅的沉淀.有時銅離子與氨作用,生成深l藍(lán)色的結(jié)合物[Cu(NH3)4]2+
    12) 這種測算方法本質(zhì)是測出氮的含量,再作蛋白質(zhì)含量的估算.只有在被測物的組成是蛋白質(zhì)時才能用此方法來估算蛋白質(zhì)含量.
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