在材料上培養(yǎng)了細(xì)胞,想做PCR 試驗(yàn),請教如何提取mRNA?
在材料上培養(yǎng)了細(xì)胞,想做PCR 試驗(yàn),請教如何提取mRNA?
生物人氣：346 ℃時(shí)間：2020-05-22 12:19:12
優(yōu)質(zhì)解答
把材料取出來,先用PBS沖洗材料2-3次,然后用0.25%胰酶在37度條件下消化材料30分鐘,用吸管輕輕吹打溶液,目的是盡量將貼附在材料上生長的細(xì)胞吹打下來,然后收集溶液,如果細(xì)胞數(shù)量不多,可以再用PBS洗滌材料,洗滌溶液與上次收集的消化溶液合并,然后4000RPM離心,輕輕棄去上清溶液,收集細(xì)胞,再用RNA試劑盒收集細(xì)胞RNA,進(jìn)行PCR實(shí)驗(yàn).
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