發(fā)酵培養(yǎng)基發(fā)酵培養(yǎng)基是供菌種生長、繁殖和合成產(chǎn)物之用.它既要使種子接種后能迅速生長,達到一定的菌絲濃度,又要使長好的菌體能迅速合成需產(chǎn)物.因此,發(fā)酵培養(yǎng)基的組成除有菌體生長所必需的元素和化合物外,還要有產(chǎn)物所需的特定元素、前體和促進劑等.但若因生長和生物合成產(chǎn)物需要的總的碳源、氮源、磷源等的濃度太高,或生長和合成兩階段各需的最佳條件要求不同時,則可考慮培養(yǎng)基用分批補料來加以滿足.
操作方法和注意事項如下
加水
打開滅菌鍋蓋,向鍋內(nèi)加水到水位線.立式消毒鍋最好用已煮開過的水,以便減少水垢在鍋內(nèi)的積存.注意水要加夠,防止滅菌過程中干鍋.
裝料、加蓋
滅菌材料放好后,關(guān)閉滅菌器蓋,采用對角式均勻擰緊鍋蓋上的螺旋,使蒸汽鍋密閉,勿使漏氣.
排氣
打開排氣口(也叫放氣閥).用電爐加熱,待水煮沸后,水蒸氣和空氣一起從排氣孔排出,當有大量蒸汽排出時,維持5min,使鍋內(nèi)冷空氣完全排凈.
升壓、保壓和降壓
當鍋內(nèi)冷空氣排凈時,即可關(guān)閉排氣閥,壓力開始上升.當壓力上升至所需壓力時,控制電壓以維持恒溫,并開始計算滅菌時間,待時間達到要求（一般培養(yǎng)基和器皿滅菌控制在121℃,20min）后,停止加熱,待壓力降至接近“0”時,打開放氣閥.注意不能過早過急地排氣,否則會由于瓶內(nèi)壓力下降的速度比鍋內(nèi)慢而造成瓶內(nèi)液體沖出容器之外.
滅菌后的培養(yǎng)基空白培養(yǎng)
滅菌后的培養(yǎng)基放于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),經(jīng)24h培養(yǎng)無菌生長,可保存?zhèn)溆?；斜面培養(yǎng)基取出后,立即擺成斜面后空白培養(yǎng)；半固體的培養(yǎng)基垂直放置凝成半固體深層瓊脂后,空白培養(yǎng).